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以下是關于小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南：
BS-2016 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒
一、試劑盒組成?
預包被酶標板?：96孔或48孔規格，含抗小鼠CXCR3單抗
標準品?：通常為80ng/瓶或240ng/L濃度，提供2-5瓶
檢測試劑?：
酶標抗體工作液(HRP標記)
顯色液(TMB A/B液)
終止液(硫酸溶液)
輔助溶液?：
10×標本稀釋液、20×濃縮洗滌液
封板膜、密封袋等耗材
二、樣本處理?
樣本類型?：血清、血漿、細胞上清液或組織勻漿
處理方法?：
血清/血漿?：1000-3000×g離心10-30分鐘，去除顆?；蚶w維蛋白
細胞上清?：離心去除細胞碎片
組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清
保存條件?：-20℃分裝凍存，避免反復凍融
三、實驗步驟?(雙抗體夾心法)
標準品稀釋?：用標準品稀釋液配制梯度濃度(如0-400 ng/L)
加樣?：
每孔加入100μL標準品或樣本，37℃孵育1-2小時
洗滌?：甩干孔內液體，加滿洗滌液靜置30秒，重復3-5次
加酶標抗體?：每孔加入100μL HRP標記抗體，37℃孵育30-60分鐘
顯色?：加入TMB底物避光反應15-30分鐘
終止與檢測?：
加終止液(50μL/孔)后立即測定450nm OD值
根據標準曲線計算樣本濃度
四、注意事項?
溫度控制?：
試劑使用前需室溫平衡20分鐘，避免低溫影響靈敏度
顯色反應需嚴格避光
操作規范?：
避免孔間交叉污染，使用獨立槍頭
邊緣孔易出現“邊緣效應"，建議棄用外周孔
數據有效性?：
標準曲線R2應≥0.99，復孔CV值<15%
五、常見問題?
靈敏度下降?：可能因試劑未恢復至室溫或超過有效期
背景過高?：洗滌不或樣本溶血導致
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